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タンパク質実験レポート
A.オボアルブミンの分離精製と精製タンパク質の定量
A-1.オボアルブミンの分離精製
目的
鶏卵から卵白を分離し、硫安分画および結晶化によりオボアルブミンを分離、精製した。
実験方法
教科書Ⅴ-18~19頁の方法に従って実験を行った。
ただし、透析外液の交換は帰宅前・翌朝の2回とした。
実験結果
実験過程において見られた主な変化を以下に示す。
卵から卵白を分離
氷冷下 ワーリングブレンダーで撹拌。(1000 rpm 5 min)
均質化卵白 30 ml
このうち、1 mlを冷蔵保存。
均質化卵白 29 ml 28.3829 g
飽和硫安 30 mlを加え、添加後拌30分撹拌。
(変化…始めは透明であったが、2 mlほど入れると白い‘もや’が発生した。7 mlほどいれると‘もや’は消えなくなり徐々に白濁した。均一な乳白色の白濁となった。)
均質化卵白飽和硫安懸濁液
遠心分離(10000 rpm 10 min 25 ℃)
得られた上清をろ過。
均質化卵白飽和硫安溶液 上清
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