資料紹介

第１章　カルスからの再分化系の確認
第1節　カルス誘導
第1項　材料および方法
材料
　Pelargonium×domesticum“Fleecy Cloud”（2n=44）〈図１・A〉の第２、第３展開葉の葉柄を用いた。
方法
　カルス誘導の実験は以下の方法で行った。
? 温室において、“Fleecy Cloud”の第２、第３展開葉をメスで切り取る。
? 採取した展開葉を流水で洗浄する。
? 葉柄を葉身と葉柄部分に切り分け、1000倍希釈したオスバンで洗浄する。
? ガラスビーカーに70％エタノールを約100ml入れ、10秒間葉柄を浸漬し、表面殺菌を行う。
? ガラスビーカーに10％の次亜塩素酸ナトリウムを約100ml入れ、Tween20を２，３滴加え、10分間葉柄を浸漬する。
? ?をクリーンベンチにいれ、滅菌水で３回すすぐ。
? オートクレーブで滅菌したろ紙で十分に水分を取る。
? 葉柄の両端をメスで切り取り、PVP　0.1mg/l、NAA　2.0mg/l、BAP　2.0mg/lと基本MS培地〈表．1〉を添加した試験管培地へ差し込む。
? 25℃明所の培養室で培養し、外植片のカルス化を観察する。
第2節　再分化実験
第1項　材料および方法
材料
　本実験には、Pelargonium×domesticum“Fleecy Cloud”のカルスを用いた。
方法
　再分化実験は以下の方法で行った。
　NAA　2.0mg/l、BAP　1.0mg/lの基本MS培地で維持されているカルスを用いて行う。
１．シュート形成
?NAA　0.1mg/l、BAP　1.0mg/lの基本MS培地にカルスを置床する。
?25℃明所の培養室で培養し、シュートの形成を観察する。
２．シュート伸長
?NAA　0.1mg/l、BAP　0.1mg/lの基本MS培地に継代する。
?25℃明所の培養室で培養し、シュートの伸長を観察する。
３．ルート誘導・伸長
?NAA　0mg/l、BAP　0.5mg/lの基本MS培地に継代する。
?25℃明所の培養室で培養し、ルートの誘導・伸長を観察する。

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第１章
カルスからの再分化系の確認
第1節　カルス誘導
第1項　　材料および方法
材料
　Pelargonium×domesticum“Fleecy Cloud”（2n=44）〈図１・A〉の第２、第３展開葉の葉柄を用いた。
方法
　カルス誘導の実験は以下の方法で行った。
温室において、“Fleecy Cloud”の第２、第３展開葉をメスで切り取る。
採取した展開葉を流水で洗浄する。
葉柄を葉身と葉柄部分に切り分け、1000倍希釈したオスバンで洗浄する。
ガラスビーカーに70％エタノールを約100ml入れ、10秒間葉柄を浸漬し、表面殺菌を行う。
ガラスビーカーに10％の次亜塩素酸ナトリウムを約100ml入れ、Tween20を２，３滴加え、10分間葉柄を浸漬する。
⑤をクリーンベンチにいれ、滅菌水で３回すすぐ。
オートクレーブで滅菌したろ紙で十分に水分を取る。
葉柄の両端をメスで切り取り、PVP　0.1mg/l、NAA　2.0mg/l、BAP　2.0mg/lと基本MS培地〈表．1〉を添加した試験管培地へ差し込む。
25℃明所の培養室で培養し、外植片のカルス化を観察する。
第2節　再分化実験...

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